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利用High-resolution melting技術測定超廣譜乙型內醯胺酶之克雷白氏肺炎桿菌抗藥性SHV codon 238和240基因型

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利用High-resolution melting技術測定超廣譜乙型內醯胺酶之克雷白氏肺炎桿菌抗藥性SHV codon 238和240基因型

Analysis of extended spectrum β-lactamases Klebsiella pneumoniae blaSHV gene codon 238 and 240 by high-resolution melting method

本研究使用高解析度熔解曲線(HRM)和DNA序列分析技術來確定超廣譜乙型內醯胺酶克雷白氏肺炎桿菌(ESBL-KP)的blaSHV基因密碼子238和240多型性,HRM技術是使用PCR擴增產物與飽和DNA染料結合的方式記錄高解析度熔解曲線對樣品進行檢測。2010年1月至2011年12月由高雄市立小港醫院分離出ESBL-KP菌株中進行blaSHV基因分析後,在114株分離出之ESBL-KP菌株中有85株(74.56%)是野生株( GGC- GAG)、3株(2.63%)是 238密碼子突變G238S (GAG-GAG→AAG-GAG)、4株(3.51%) 240密碼子突變 E240K (GGC- GAG→GGC- AAG) 突變、22株(19.30%)密碼子238和240 (GGC- GAG→AGC- AAG )具有雙重突變。本實驗HRM方法敏感度100.0%、特異性100.0%、陽性預測值100.0%、陰性預測值100.0%。我們的結論是在分子流行病學研究上以高解析度熔解曲線為基礎的方法檢測也是另一種基因型鑑定的工具。

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